Justin Timberlake, hijo de Randall Timberlake y Lynn Bomar, nació en Memphis, Tenessee. Su abuelo paterno, Charles L. Timberlake, era un ministro de la Iglesia Bautista, por lo que a Justin le fue inculcada esa religión (aunque él se considera "más espiritual que religioso", sigue siendo cristiano).

Sus padres se separan en 1985, y luego se juntaron. Su mamá, que ahora dirige una compañía de entretenimiento llamada Just-in Time Entertainment, es esposa del banquero Paul Harless cuando Justin tenía 5 años de edad. Su padre, un director de coro en una iglesia Bautista, tiene dos hijos con su actual esposa Lisa: Jonathan (nacido en 1993) y Stephen (nacido en 1998). (Laura Chwieseni, una medio-hermana de Justin murió luego de nacer en 1997 y fue mencionada por él como "Mi ángel en el cielo" en uno de sus albumes).

Vivio en Millington, pueblo del norte de Memphis. Su primera experiencia musical fue interpretando musica country en un programa de tv busca talentos Star Search, bajo el nombre de Justin Randall.

En 1993, se hizo muy famoso, participando con unos niños de un grupo llamado The Mickey Mouse Club. Allí conoció a su futura novia Britney Spears, a su futura compañera de giras Christina Aguilera y a su futuro compañero de banda JC Chasez. Cuando el show terminó en 1995, Timberlake reclutó a Chasez para participar en la nueva banda de chicos que el productor Lou Pearlman estaba preparando junto a Chris Kirkpatrick. El grupo se llamaba 'N Sync. En 1999, Justin actuó como Jason Sharpe en la película para televisión Model Behavior.

Timberlake formo parte de la banda 'N Sync y fue considerado un ídolo adolescente. El grupo se formó en 1995 y al otro año comenzo su carrera. Dos años más tarde logró el éxito en Estados Unidos. En el año 2000 lanzaron el mas velozmente vendido album, No Strings Attached, del cual se vendieron 2,4 millones de copias durante la primera semana en el mercado. En el año 2002, luego de concluír la gira Celebrity Tour, la banda paro por un tiempo. En ése momento, Timberlake trabajo como solista. El álbum fue la transición de su imagen de adolescente a una apariencia más sensual y madura. Pasado el tiempo, Justin declaró a la revista Rolling Stone que Lou Pearlman estaba estafando a la banda.

En agosto de 2002, luego de pasar meses grabando el álbum, Timberlake participo de la apertura de los MTV Video Music Awards 2002, donde presentó el primer sencillo: Like I Love You. La canción alcanzó el puesto número 11 de la lista de popularidad Billboard Hot 100. luego lanzó su álbum como solista, Justified, el 5 de noviembre de 2002. Ese disco tubo menos exito que cuando estubo junto a 'N Sync. Debutó en el número 1 del Billboard 200, vendiendo 439.000 copias en su primera semana. Eventualmente, se vendieron más de 3 millones de copias en Estados Unidos y más de 7 millones en todo el mundo. El disco también fue criticado por los especialistas, debido a la influencia R&B que los productores Timbaland y The Neptunes habían puesto en él. Del álbum se desprendieron cuatro exitosos singles, incluyendo Cry Me a River y Rock Your Body, los que estuvieron dentro de los 10 temas más populares.

Timberlake estubo junto a Christina Aguilera en el año 2003 promocionando su trabajo, el tour se denominó Justified/Stripped Tour. Durante varias presentaciones de la gira, el grupo The Black Eyed Peas estuvo a cargo del acto de apertura, por su parte, Timberlake participó en su exitoso single Where Is the Love? sin aparecer en los créditos, ni el video musical de la canción. El sello discoggráfico de Justin no quería que él participara en aquella canción temiendo que se desconcentráse la atención de sus lanzamientos como solista. Aún así, Timberlake apareció a menudo con The Black Eyed Peas para interpretar dicho tema en vivo, como cuando subió sorpresivamente al escenario mientras The Black Eyed Peas cantaba en la ceremonia de entrega de los premios MTV Europe Music Awards 2003. Ese año, fue grabada I'm Lovin' It que fue usada para la campaña publicitaria de la cadena de comida rápida McDonald's. con este contrato, que se estima en una suma de US$6 millones.

Timberlake dejo de cantar por un tiempo, para comenzar con la actuación. El primer rol que desempeñó durante ésta época fue el de un periodista en la película Edison Force9 , que fue filmada en el año 2004 y fue lanzada directamente en vídeo el 18 de julio de 2006. También apareció en los filmes Alpha Dog10 , Black Snake Moan11 y su voz fue la del personaje Artie en la pelicula animada Shrek III12 , estrenada el 18 de mayo de 2007. Además, encarnó a un joven Elton John en el vídeo musical del propio Elton This Train Don't Stop There Anymore13 .

Siguiocolaborando con otros artistas. Luego de Where Is the Love?, Justin colaboró nuevamente con The Black Eyed Peas en la canción My Style del álbum Monkey Business (2005). Fue partede Work It, que fue remezclado e incluído en el disco de remezclas del rapero Nelly en 2003.

Mientras grababa la canción Signs junto a Snoop Dog, se encontraron problemas en su garganta. El 5 de mayo de 2005, Timberlake fue operado por nodulos. Se le aconsejó no cantar, ni hablar fuerte, por lo menos durante un año . En el año 2005, Justin instaló su propio sello discográfico: JayTee Records.

Timberlake hizo un cambio en el video musical de Nelly Furtado y Timbaland Promiscous. Lanzó su segundo álbum como solista, FutureSex/LoveSounds, el 12 de septiembre de 200615 . Su trabajo estubo en la primera posicion de Billboard16 , vendiendo 684.000 copias en su primera semana17 . Tiene mayotia de venta por pre-orden de la tienda de música digital iTunes18 y rompió el récord alcanzado por la banda británica Coldplay del mayor número de ventas digitales en una semana. El disco fue producido por Timbaland y Danja, will.i.am, Rick Rubin y el propio Timberlake. Incluye colaboraciones de Three 6 Mafia, T.I. y will.i.am.

El primer sencillo del álbum, SexyBack, lo interpreto en la apertura de MTV Video Music Awards del año 2006 y alcanzó el puesto número 1 de la lista Billboard Hot 100, donde permaneció por siete semanas consecutivas19 . My Love, el segundo single del álbum, también producido por Timbaland y con colaboraciones del rapero T.I., alcanzó el número 1 de la lista Hot 10020 , así como el tercer sencillo What Goes Around.../...Comes Around Interlude21 . a mediados del 2006 dejo el canto de lado para dedicarse mas a la actuacion, especificando que abandonar la industria de la música sería "algo tonto a éstas alturas" . Él fue el invitado especial para actuar durante el desfile de modas de Victoria's Secret 200623 .

En enero de 2007, Timberlake inició la gira de conciertos FutureSex/LoveShow. El cuarto sencillo del álbum FutureSex.. fue Summer Love/Set the Mood Prelude en Estados Unidos y LoveStoned/I Think She Knows Interlude en el Reino Unido.